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DNA鉴定之微测序法

来源:http://www.zhkysw.com/news/165.html   发布时间:2020-01-16

微型测序的本质是单核苷酸引物延伸(SNuPE)或单碱基延伸(SBE)。该过程首先使用PCR扩增包含目标SNP位点的DNA片段。然后将微测序引物添加到产物中,以在测序仪上进行碱基延伸反应,其中测序引物3'端的碱基与多态性碱基相邻,并且在DNA聚合酶的作用下,仅引物进行一个碱基的延伸以终止反应,即可以添加仅带有一个荧光标记的ddNTP,以通过毛细管电泳检测荧光信号类型以获得延伸碱基的信息。
DNA鉴定之微测序法
与其他方法相比,该方法灵敏且重复率高。所使用的设备是大多数实验室中的常规设备,因此此方法易于推广。但是,微测序法也存在一定的问题,即在一个反应中仅检测到一个SNP时,成本较高;对涉及该引物的所有引物都有严格的要求。在复合PCR和延伸反应的过程中,需要适当的引物结构,浓度比和退火温度,且测序引物的序列通常很长,甚至超过50mer。

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